Metode-metode yang dapat digunakan untuk mengisolasi
biakan murni mikroorganisme antara lain cawan gores (sterak plate), cawan
tebar, dan cawan tuang.
1. Teknik Dilusi (Pengenceran)
Gambar 1. Teknik Dilusi
Teknik dilusi sangat penting di
dalam analisa mikrobiologi. Karena hampir semua metode perhitungan jumlah sel
mikroba mempergunakan teknik ini, seperti TPC (Total Plate Count).
Cara Kerja
:
-
Dari
larutan kultur kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades atau
larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/10 bagian.
-
Dari
larutan dilusi 1/10 kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades
atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/100 bagian.
-
Dari
larutan dilusi 1/100 kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades
atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/1000 bagian.
-
Dari
larutan dilusi 1/1000 kita ambil 1 ml dan kita masukkan ke dalam 9 ml aquades
atau larutan buffer pepton untuk memperoleh dilusi 1/10.000 bagian.
-
Dan
seterusnya
Maksud
dari 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10.000 dst adalah suatu rasio dilusi yang apabila
pada tiap dilusi ditumbuhkan ke dalam suatu media dan koloninya yang tumbuh
dapat dihitung, maka jumlah sel mikroba dapat diketahui dengan cara :
 Jumlah koloni x |
1
|
|
Pengenceran
|
Misal :
Apabila pada dilusi 1/100 tumbuh sebanyak 20
koloni, maka dapat diketahui jumlah sel adalah :
|
20 koloni x |
1
|
= 2000 sel
|
|
1/100
|
Apabila pada dilusi 1/1000
tumbuh sebanyak 3 koloni, maka dapat diketahui jumlah sel adalah :
 2 koloni x |
1
|
= 3000 sel
|
|
1/1000
|
Oleh karena itu, dengan metode
dilusi kita dapat memperkirakan jumlah sel mikroba pada suatu benda atau
produk.
2. Teknik Pour Plate (Lempeng
Tuang)
Teknik Pour Plate adalah suatu teknik dalam menumbuhkan mikroorganisme
dalam media agar dengan cara mencampurkan media agar cair dengan stok kultur.
Teknik ini umumnya digunakan pada metode Total
Plate Count (TPC). Sedangkan teknik streak
plate adalah suatu teknik dalam menumbuhkan mikroorganisme dalam media agar
dengan cara menggores (streak)
permukaan agar dengan jarum yang telah diinokulasi dengan kultur mikroba.
Teknik ini menjadikan mikroorganisme tumbuh dan tampak pada goresan-goresan
inokulasi bekas jarum.
3. Teknik Streak Plate
Gambar 2 . Teknik Streak Plate
Teknik streak plate (lempeng gores) adalah suatu teknik
di dalam menumbuhkan mikroorganisme di dalam media agar dengan cara menstreak
(menggores) permukaan agar dengan jarum ose yang telah diinokulasikan dengan
kultur bakteri. Dengan teknik ini mikroorganisme yang tumbuh akan tampak dalam
goresan-goresan inokulum bekas dari streak jarum enten.
4.
Pemeliharaan Kultur pada Slant Agar
(a)
(b)
Gambar 3. Teknik Slant Agar. (a) memasukkan kultur pada slant agar (b) bagian-bagian yang akan
dipindahkan
Agar slants adalah kultivasi biakan
mikroba ke dalam agar miring di dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik
koloni bakteri yang tumbuh. Tiap bakteri memiliki karakteristik koloni yang
berbeda.
0 komentar:
Posting Komentar